文章导读:
苎麻(Boehmeria nivea L.)是一种多年生草本纤维作物,叶和根中富含绿原酸(CGA),具有显著抗氧化和药用价值,同时可作为优质动物饲料。苎麻栽培历史悠久,在中国已有4700多年,因其纤维和营养价值被广泛应用。绿原酸是其重要次级代谢物,但其在苎麻中的积累机制尚不清楚。
扬州大学研究团队于2026年4月21日在著名期刊Horticulture Research上发表标题为“The telomere-to-telomere genome and comparative analysis from algae to higher plants reveal origin and evolution of biosynthesis of chlorogenic acid pathway and production in ramie (Boehmeria nivea L.)”的研究性论文,研究构建了苎麻高质量T2T基因组,揭示了绿原酸的生物合成途径及关键基因,为苎麻品种改良提供了重要基因资源和理论基础。

主要研究成果
1.苎麻基因组组装及评估
本研究完成了苎麻种质“1380”的高质量T2T基因组组装,通过整合Illumina、PacBio和ONT测序数据,利用Hifiasm组装与Hi-C染色体定位,构建了包含14条伪染色体的初步基因组。经ONT读段填补缺口后,获得无缺口参考基因组Bniv_1380,总长度344 Mb,N50为24.40 Mb。端粒和着丝粒分析显示所有28个端粒和14个着丝粒位置明确,其中除1、8、14号染色体外,其余为顶端着丝粒染色体。Illumina和HiFi读段比对覆盖率均超过99%,LAI达21.74,BUSCO完整性为99.8%。

图1 苎麻Bniv_1380基因组组装与基因组特征分析

表1 苎麻Bniv_1380基因组组装统计

表2 苎麻Bniv_1380基因组组装质量评估
2.苎麻基因组注释
对Bniv_1380基因组进行系统注释,结果显示重复序列占61.19%,其中以MITE和LTR最为丰富。通过整合同源预测、de novo预测及转录组证据,共鉴定出25,853个基因,平均编码序列长度为3,098.7 bp,平均外显子数为4.89,外显子平均长度为280.7 bp。与野生青叶苎麻及栽培品种相比,本组装新增超过5,000个基因,编码序列和外显子长度分布略有差异。约90.52%的基因获得功能注释,同时预测出3,325个非编码RNA。
3.苎麻进化分析
对14个物种的同源基因进行分析,本研究在Bniv_1380基因组中鉴定出36,767个基因家族,与野生及栽培苎麻相比,本组装中鉴定出774个扩展基因家族,其中纤维生长相关基因及至少113个参与生长素信号通路的基因呈现扩张趋势,功能富集分析显示这些基因显著富集于植物激素信号转导途径。染色体结构比较揭示三个品种间存在部分结构变异。系统发育分析表明,苎麻与草莓(Fragaria vesca)、枣(Ziziphus jujuba)及桑(Morus notabilis)亲缘关系最近,分化时间约为5-9百万年前,“1380”种质位于野生与栽培类型之间,说明其为未经过系统改良的地方品种。

图2 苎麻与近缘物种的系统发育及共线性分析
4.植物中绿原酸途径的演化
植物中绿原酸合成途径涉及四条主要代谢路线,关键基因包括PALs、C4Hs、4CLs、C3Hs和HCTs。这些基因在咖啡、菊花、金银花、杜仲和向日葵等植物中普遍存在且保持共线性,保障了绿原酸的高效合成;而部分藻类中则缺失这些基因。除4CL外,其余基因在不同植物间共线性较弱,可能与进化过程中的基因变动有关。苎麻中缺失HQT和HCGQT基因,限制了部分合成途径,但C4H基因发生扩张(共6个拷贝,其中5个属于扩张组),可能是其绿原酸含量较高的重要原因。这些关键基因起源于陆生植物,其中PALs与4CLs在被子植物中发生分化,导致不同植物的绿原酸合成能力存在差异。

图3 植物中保守绿原酸合成基因的发现与演化分析
5.苎麻根和叶的代谢比较
本研究利用LC-MS/MS比较了苎麻叶和根的代谢差异,在正、负离子模式下分别检测到903和396种化合物。主要代谢物包括脂类及脂类相关分子、苯丙素类和多酮类、有机酸及其衍生物,其中脂类在根中占比更高。检测到的代谢物分别归属于14条和13条KEGG通路。PCA和PLS-DA分析显示,叶和根的代谢谱明显分离,表明二者代谢组成具有显著差异。通过筛选获得310个上调和522个下调的差异代谢物。根中原花青素A2和鸢尾黄素含量显著高于叶,而叶中补骨脂酚和欧当归内酯A含量高于根。这些结果说明苎麻代谢物具有明显的组织特异性。

图4 苎麻绿原酸代谢通路的关键代谢物
6.苎麻中绿原酸的生物合成途径
本研究进一步探讨了苎麻中绿原酸的生物合成机制。结果显示,根中绿原酸含量约为叶片的10倍,且相关前体与中间产物在根中积累更多。转录组分析发现,根和叶之间存在大量差异表达基因,其中涉及苯丙烷代谢及绿原酸合成的关键酶基因(如PAL、4CL、C4H、HCT、C3H)在根中表达更高。同时,调控这些基因的转录因子在根中也更为活跃,与代谢物积累趋势一致。尽管部分基因在叶中表达较高,但绿原酸仍在根中大量积累,可能与酶活性调控及细胞内物质区室化分布有关。实验进一步证实,关键酶C3H能够催化绿原酸前体转化为绿原酸,说明根部高效的酶促反应是其绿原酸高积累的核心原因。

图5 苎麻绿原酸的代谢通路与差异基因鉴定
文章小结
本研究对苎麻种质“1380”进行了高质量基因组组装与注释。进化分析发现苎麻在纤维生长相关基因上呈现扩张趋势。代谢组学比较表明,苎麻根中绿原酸含量约为叶片的10倍,且相关合成关键酶在根中高表达,其中C4H基因扩张与C3H酶高活性是其主要原因。该研究不仅提供了苎麻高精度基因组图谱,更系统解析了其绿原酸高效积累的分子与代谢机制。